Test FISH

Del Test FISH è un test cromosomico microscopico nella diagnosi prenatale e carcinoma di cancro al seno, cancro gastrico e leucemia linfatica cronica. Il test, il cui risultato è disponibile entro 1 o 2 giorni, può principalmente rilevare anomalie cromosomiche che possono essere ricondotte a un insieme alterato di cromosomi in determinati cromosomi. Il test viene eseguito esclusivamente come test di accompagnamento o preliminare per un'analisi cromosomica dettagliata, i cui risultati sono disponibili solo 2-3 settimane dopo che le cellule sono state rimosse.

Cos'è il test FISH?

Il test FISH (Ibridazione in situ a fluorescenza) nella diagnosi prenatale consente di trarre conclusioni su un insieme modificato di cromosomi per determinati cromosomi. Per eseguire il test FISH sono necessarie almeno 50 cellule fetali incolte (cellule di amnios), prelevate dal liquido amniotico (circa 2-3 ml). Un metodo alternativo per ottenere cellule idonee è il campionamento dei villi coriali, in cui le cellule vengono prelevate dall'area di attacco del cordone ombelicale mediante biopsia.

Una speciale procedura consente di differenziare tra loro i singoli filamenti dei cromosomi 13, 18, 21 e dei cromosomi X e Y mediante colori fluorescenti, in modo che un'eventuale trisomia possa essere identificata dalla presenza di tre anziché due filamenti omologhi di un cromosoma . Nel cancro gastrico e mammario, il test FISH può essere utilizzato per verificare se il tumore ha più di due copie del gene HER2 / neu (recettore del fattore di crescita epidermico umano), che ha conseguenze per il tipo di chemioterapia. Nelle malattie della leucemia linfocitica cronica, gli spostamenti cromosomici più frequenti in alcuni geni possono essere determinati mediante diverse analisi del test FISH su campioni di midollo osseo e sangue periferico, che ha anche un'influenza sulla terapia.

Funzione, effetto e obiettivi

I cromosomi nei nuclei cellulari isolati vengono fatti dividere la loro struttura a doppia elica mediante uno speciale trattamento chimico o per azione del calore, e sonde di DNA cromosomiche specifiche con la rispettiva sequenza di DNA complementare si collegano ai “loro” cromosomi specifici. Le sonde di DNA sono contrassegnate con colori fluorescenti di diversi colori in modo che i cromosomi contrassegnati possano essere distinti l'uno dall'altro utilizzando un software speciale e contati in un processo automatizzato.

Sono noti z. B. Trisomie in cui ci sono tre invece di due filamenti cromosomici per un cromosoma Sono note anche le cosiddette monosomie in cui è presente un solo filamento del cromosoma X e tre o quattro filamenti omologhi di tutti i cromosomi. I più importanti cambiamenti cromosomici rilevabili con il test FISH nella diagnosi prenatale sono la sindrome di Ullrich Turner (monosomia X), la sindrome della tripla X (trisomia o polisomia X), la sindrome di Klinefelter, in cui in tutto oppure una parte delle cellule somatiche nei ragazzi ha un cromosoma X aggiuntivo (XXY invece di XY), sindrome di Down (trisomia 21), sindrome di Edwards (trisomia 18) e sindrome di Patau (trisomia 13).

La monosomia X, in cui le ragazze hanno un solo cromosoma X, è solitamente fatale, il che significa che in circa il 98% dei casi porta ad un aborto spontaneo entro i primi tre mesi di gravidanza. Nel caso in cui un parto avvenga comunque, le bambine hanno un'aspettativa di vita normale, sono di intelligenza media, ma spesso soffrono di una serie di malformazioni degli organi interni e sono per lo più sterili. La sindrome della tripla X con il set cromosomico XXX colpisce solo le ragazze. È possibile una gravidanza e un parto normali.

Le donne per lo più alte con il triplo cromosoma X possono vivere normalmente e di solito non mostrano anomalie fisiche, anche se le difficoltà di apprendimento non sono rare e si verificano problemi con le capacità motorie fini. La sindrome di Klinefelter, che può colpire solo ragazzi e uomini, è caratterizzata da un cromosoma X aggiuntivo che è presente in tutte le cellule del corpo o solo parzialmente. Le caratteristiche fisiche sono di altezza superiore alla media con braccia e gambe insolitamente lunghe. La sindrome di Klinefelter di solito porta a una ridotta crescita dei testicoli con un ridotto rilascio di testosterone.

La sindrome di Down, sinonimo di trisomia 21, è per lo più associata a determinate caratteristiche fisiche e con limitazioni cognitive. Esistono diverse forme di trisomia 21, di cui la cosiddetta trisomia libera 21 è predominante con circa il 95% dei casi. La trisomia 18 (sindrome di Edwards) causa aborto spontaneo nella maggior parte dei casi, è associata a una varietà di caratteristiche fisiche e l'aspettativa di vita è di pochi giorni. La trisomia 13 (sindrome di Pätau) è inoltre caratterizzata da un gran numero di caratteristiche fisiche e sviluppi indesiderati, che spesso portano ad aborti spontanei o nati morti. L'aspettativa di vita dei bambini a termine è di pochi anni.

Lo scopo del test FISH prenatale è quello di rilevare anomalie cromosomiche note in una fase precoce al fine di offrire ai genitori l'alternativa di un aborto legale per portare a termine il bambino. Nel cancro al seno e al fegato, i carcinomi possono essere controllati per un numero maggiore del gene HER2 / neu utilizzando il test FISH. Nel caso positivo, c'è una maggiore formazione di recettori dei fattori di crescita che rispondono a determinate chemioterapie. Sono disponibili anche test FISH per identificare specifiche anomalie genetiche nella leucemia linfocitica cronica (LLC) che migliorano la composizione di agenti chemioterapici efficaci.

Rischi, effetti collaterali e pericoli

Il test FISH in sé non è associato a rischi o pericoli. Solo l'estrazione delle cellule da esaminare mediante biopsia o prelievo di liquido amniotico (amniocentesi) sono associate a un minor rischio di infezione per la loro natura invasiva. La specialità è che il test FISH può rivelare alcuni difetti cromosomici specifici, ma non è certo che non vi siano aberrazioni cromosomiche in caso di risultato negativo, poiché non tutte le anomalie possono essere rilevate dal test FISH. In caso di risultato positivo del test, è necessario seguire ulteriori procedure diagnostiche per confermare il risultato o rifiutarlo come falso.